NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)訂購(gòu)流程：
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NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)功能：
（1）       血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）       表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）       與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（1）       主動(dòng)脈硬化。
（2）       主動(dòng)脈瘤
（3）       主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（1）       組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）       鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）       原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）       每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）       肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。


小單孢菌 Micromonospora sp.地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum喜鹽芽胞桿菌 Halobacillus sp.

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae黃灰青霉 Penicillium aurantiogriseum

Du145/前列腺細(xì)胞涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis

泡盛曲霉 Aspergillus awamori日本裂殖酵母易變變種 Schizosaccharomyces japonicus var. versatilis

褐球固氮菌 Azotobacter chrooccumHCT116, 人結(jié)直腸細(xì)胞

涎沫假絲酵母 Candida zeylanoides曲霉屬 Aspergillus sp.

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis香菇 Lentinula edodes

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii唾液桿菌水楊素亞種 Lactobacillus salivarius subsp. salicinius

小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基海洋芽胞桿菌 Oceanobacillus sp.

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum

Ca Ski(人宮頸上皮細(xì)胞)麥角甾苷

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)78-5000 pg/mL人Ras激酶抑制劑2(KSR2)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mLELISA Kit for Human Kinase suppressor of Ras 2

15.6-1000 pg/mL人kelch樣蛋白17（klhl17）ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mLELISA Kit for Human Kelch-like protein 17

0.156-10 ng/mL人角蛋白Ⅱ型表皮細(xì)胞骨架2 (Keratin, type II cytoskeletal 2 epidermal)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Keratin, type II cytoskeletal 2 epidermal

0.156-10 ng/mL人細(xì)胞角蛋白19(KRT-19)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Keratin, type I cytoskeletal 19
NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線